蛋白表達質粒的接合轉移方法
發布日期:2021-12-18 瀏覽次數:264
表達載體是指具有宿主細胞基因表達所需調控元件,能使克隆的基因在宿主細胞內轉錄與翻譯的載體。也就是說,克隆載體只是攜帶外源基因,使其在宿主細胞內擴增;表達載體不僅使外源基因擴增,還使其表達。外源基因在受體細胞內表達與否及表達水平受到許多因素(調控元件)的制約。
各種表達系統各有其優缺點,大腸桿菌和酵母表達系統蛋白表達水平高,生產成本低,但它們的加工修飾體系與昆蟲細胞、哺乳動物細胞不*相同;哺乳動物細胞產生的蛋白質更接近于天然蛋白質,但其表達量低、操作繁瑣。
各種表達系統由于翻譯后的加工不*相同,因而產生的重組蛋白的生物學活性和免疫原性有時會有差別。因此,選擇表達系統時,必須充分考慮各種因素,如所需要表達的蛋白是否有毒性,是否有活性,是否需要糖基化,還需要考慮成本、產量及純化路線和安全性。
蛋白表達質粒的接合轉移方法:是細菌遺傳物質轉移的一個重要方式。在質粒轉移過程中,供體菌和受體菌通過結合作用緊密接觸,質粒從供體細胞向受體轉移,同時進行質粒復制。按能否自主轉移,可以將天然存在的質粒分為轉移型質粒和非轉移型質粒兩大類。這里要注意的是,獲得質粒的細菌可隨之而獲得一些生物學特性,如耐藥性或產生細菌素的能力等。從環境友好出發,實驗室里的廢棄菌液,一定要滅過菌才能倒哦。