影響穩轉細胞株建立的主要因素是什么?

　　穩轉細胞株是指持續穩定地在細胞中表達特定基因，或抑制特定基因的表達。 穩定細胞株的目的將基因質粒DNA整合到細胞染色體上，細胞長期穩定表達該基因。 在基因功能的研究中，基因是否有效轉染靶細胞是功能研究的前提條件之一。 另一方面，穩定表達細胞株彌補了外源基因在一些瞬時感染(或轉染)的功能實驗中表達時間短的缺點，便于長期觀察基因對細胞功能的影響和蛋白之間的相互作用。
　　穩轉細胞株建立的時間：
　　需要長期在目的細胞中研究基因功能，建立穩定的周轉細胞系可以降低頻繁轉染和病毒包裝的成本，便于實驗研究
　　部分蛋白質半衰期極長，瞬時RNA只能干擾表達，不能清除已經表達的目的蛋白。 建立穩定細胞系可以達到更好的基因干預效果；
　　瞬轉會引入*拷貝數的表達，人為因素導致實驗結果不準確，建立穩定旋轉細胞系有助于篩選拷貝數適量的細胞進行實驗研究
　　需要誘導表達系統主要是在需要一些致死基因或時空表達的情況下；
　　需要用細胞進行動物實驗的，如裸鼠腫瘤形成等，往往需要建立穩定旋轉細胞系。
　　影響穩轉細胞株建立的主要因素是什么？
　　整合位點轉錄活性：決定外源基因片段在穩定株中的表達質量；
　　外源基因整合率：決定穩定株篩選的難易程度；
　　插入外源基因片段的拷貝數：通常低拷貝或單拷貝可以減少人為干擾；
　　外源基因片段整合到細胞后的穩定性：不同整合位點決定了染色體中外源片段的穩定性，部分區域容易發生重組和丟失，穩定株篩選后出現丟失現象。